técnica e stoll

 

Técnicas de cuenta de huevos en heces la Técnica de stoll

(Cuantitativa)

Objetivo:

Realizar correctamente esta técnica para así realizar el conteo y cálculo de huevecillos de helmintos. Y así realizar la técnica cuantitativa.

Introducción:

Esta técnica consiste en contar los huevecillos de helmintos por eso se denomina cuantitativa, esta consiste en aclarar y homogenizar.

NEMATODOS: Gusano cilíndrico, también nematodo, es el nombre común de cualquier miembro de un filo de gusanos no segmentados.

ASCARIS: Áscaris, género de gusanos parásitos del filo de los Nematodos. Sus huevos se desarrollan en el agua o en tierra húmeda, y a las pocas semanas de su maduración en el suelo, se vuelven infectantes.

TRICHURIS: los huevos necesitan tres semanas o más para madurar en una forma infectante, según la temperatura, humedad y naturaleza del suelo en el que depositan los huevos.

Para calcular estos huevecillos se hace el siguiente cálculo, este cuando se hace a 56 ml de NaOH:

1.    La disolución fecal original es de 1 en 15 (4ml/60ml). Como se contaron los huevos en volumen total de 0.15 ml, el número total de éstos en 1ml de heces se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100 (1/5 x 0.15 x 100=1).

2.    Suponiendo que el promedio de una persona rebasa los 100 g de heces por día, es posible calcular el número de huevos por día multiplicando el resultado por 100 (o la cuenta de la suspensión original por 10 000).

3.    Para determinar el número de parásitos hembras presentes, se divide el número diario de huevecillos que hay en las heces entre el número promedio de

Hembra de la especie NECATOR: 7000 huevos/dia

Hembra de la especie ASCARIS: 200000 huevos/día

Hembra de la especie TRICHURIS: 7500 huevo/día

4.    se encuentra la cantidad total de parásitos al multiplicar por dos resultados encontrados en el paso tres, ya que se supone que en cualquier infestación hay un parásito macho por cada parásito hembra.

Fundamento:

Especie	Hábitat del adulto	Forma infectante	Formas diagnosticas
Áscaris lumbricoides	Intestino delgado y grueso del hombre; pueden migrar a conductos biliares o pancreáticos.	Huevos fértiles	Huevos fértiles: 60 x 45, redondos u ovoides, con una cáscara gruesa cubierta por una capa albuminosa; células internas en varios estadios de clivaje. Tienen color marrón. Huevos descorticados: las enzimas digestivas pueden disolver la capa albuminosa, dejando al huevo con una superficie descorticada lisa. Huevos infértiles: 90 x 40, cascara delgada con perdida de cobertura albuminosa. Gusanos adultos: 25cm a 35cm de longitud. Los machos son más pequeños que las hembras y tienen cola curva.
Trichuris trichiura	Intestino grueso	huevos fértiles	Huevos: 54 x 22, elongados, en forma de barril con tapones hilianos en ambos polos. La cáscara es amarilla a marrón; los tapones son incoloros. Gusanos adultos: 33 mm a 45 mm, porción anterior atenuada, semejante a un látigo; porción posterior corta y gruesa, a modo de mango.
Necator americanus	Intestino delgado. El es el cólex del adulto está firmemente adherido a la mucosa mediante placas cortantes.	Larvas  filariformes que penetran la piel,	Huevos: 65 x 40 tienen morfología similar A. duodenale. Larvas rabditiformes: semejantes a  A. doudenale. Cabeza del adulto: parte de la boca provista con placas cortantes agudas.

Material:

·         Aplicadores

·         Abate lengua

·         Tubos de ensaye cónicos

·         Cuentas de vidrio

·         Portaobjetos

·         cubreobjetos

Reactivos:

·         hidróxido de sodio (NaOH)

Reactivos biológicos del ser humano:

·         heces fecales

Método:

1)    se llena el tubo de ensaye cónico a 5.6 ml de NaOH 0.1 N.

2)    con el aplicador se agrega las heces hasta elevar el nivel de líquido a 6ml.

3)    Se añaden 10 cuentas de vidrio, se tapa con firmeza y se agita hasta que las heces se desmoronen por completo.

4)    Cuando las heces estén disueltas por completo, se agita el tubo un minuto y de inmediato se toman 0.075 ml de suspensión y se colocan en un portaobjetos y se coloca el cubreobjetos.

5)    Se coloca en el microscopio y con el objetivo de 40X se buscan los huevos.

Resultados:

Nosotros no encontramos ningún huevecillo pero cuando en esta técnica se llega a encontrar huevecillos se hace un calculo que fue el y ya hablado anterior mente.

Vista 40X:

Esta es una imagen de nuestra muestra donde podemos observar a las 7 estas señaladas con rojo se 10 fibras musculares, 

 

Muestra del equipo 3:

Esta muestra me llamo mucho la atención por observo un huevecillo este señalado con una flecha azul

Muestra del equipo 2:

En esta muestra se puede observar detalladamente algunas fibras vegetales.

Muestra del equipo 4:

Aquí se puede observar una fibra de residuo vegetal,  este señalado con una flecha amarilla.

 







Muestra del equipo 1:

Aquí esta muy caro se muestra células vegetales.

Conclusión:

Nosotros para hacer esta práctica hay que saber diferenciar entre:

            - Cualitativos: Son aquellos que solo nos informan si hay o no formas
                               parasitarias en el producto estudiado.

       - Cuantitativos:   Nos dan a conocer numéricamente cuantas formas
                                   parasitarias están presentes, las cuales se reportan
                                   por   gramo o mililitro   de heces, según la técnica
                                   que se utilice.

Esta técnica en general es precisa para hacer conteo de huevos.

Comentario:

En lo personal esta practica me pareció un poco fácil, ya que no tenemos que centrifugar ni nada de eso, me hubiese gustado haber encontrado huevecillos de algún parásito y así proceder con esta técnica como se nos dice y hacer el calculo correctamente, así tener el resultado fijo y claro.

Fuentes de información:

http://es.scribd.com/doc/51575922/1/METODO-DE-STOLL