martes, 20 de marzo de 2012

práctica 4: cuenta de eritrocitos

PRACTICA: 4

CUENTA DE ERITOCITOS

Objetivo:

Este examen puede ayudar a diagnosticar anemia y otros problemas de salud que afectan los glóbulos rojos. Establecer un diagnostico presuntivo que sirva de ayuda al médico trate para localizar la causa probable en alguna enfermedad de tipo hematológico.

Fundamento:

El rencuentro de eritrocitos consiste en contar el número de ellos en 1mm˄3 de sangre.

Este es un examen donde se cuenta el número de eritrocitos que se tiene en la sangre del cuerpo esto debe tener una referencia de valores normales, si no se tienen los valores normales se debe a una enfermedad de tipo hematológico la cual se determina al observar que la cuenta de eritrocitos no es la referencial.

Son mucho más útiles las mediciones exactas de hemoglobina y hematocrito que la de GR, se requieren más tiempo y están expuestas a errores. La pipeta de thoma para glóbulos rojos se utiliza en el rencuentro, esta presenta una dilatación (bulbo) como a la tercera parte de la longitud total del tubo capilar. El tallo o extremo más largo de la pipeta está dividido en 10 partes iguales. En la parte más corta se encuentra la señal 101, cuando se llena esta señal, el bulbo contiene 100 veces el volumen correspondiente a las divisiones de la parte larga.

Introducción:

Los glóbulos rojos son células anucleadas que se forman en la médula ósea a partir de «stem cells». Una vez en la circulación tienen como principal función transportar oxígeno a los tejidos, tarea que desarrollan por aproximadamente 120 días, hasta que el sistema fagocítico mononuclear los retira de la circulación.

Para realizar este conteo se debe utilizar la cámara de Neubauer esta es una cámara adaptada al microscopio de capo claro se trata de un portaobjetos con una depresión el centro, es un cuadro de 3x3mm con una separación de dos líneas consecutivas de 0.25mm así pues el área sombreada y marcada con L corresponde a un milímetro cuadrado. La depresión central del cubreobjetos está hundida 0.1mm respecto a la superficie de forma que cuando se cubre con le portaobjetos el o volumen es de 0.1 m cúbicos.

En la Cámara de Neubauer tradicional, está dividido en 16 cuadrados medianos y cada uno de ellos se halla dividido a su vez en 25 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total). Además la última fila y la última columna de cuadrados pequeños está dividida al medio. En cambio, en la cámara de Neubauer modificada el cuadrado grande central está dividido en 25 cuadrados medianos y cada uno de ellos está dividido en 16 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total). Cualquiera sea la cámara empleada, este cuadrado grande central es el empleado en el recuento eritrocitario y plaquetario. En la siguiente figura podemos observar más detallada la cuadricula de esta cámara y coloreada con color jojo podemos observar donde se hace el recuentro de eritrocitos.


Reactivos:
·         Diluyente de Hayem
·         Sangre venosa

Material y Equipo:


·         Cámara de Neubauer

·         Pipeta de glóbulos rojos (thoma)

·         Microscopio

·         Boquilla

·         Papel filtro



Técnica:

1.      Mezclar la sangre obtenida con el anticoagulante o tomar sangre capilar.

2.      Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la disolución será de 1/100, limpiar la punta con gasa o papel absorbente.


3.      Introducir la pipeta en el tubo o frasquito conteniendo diluyente (hayem) y llenar de líquido de dilución hasta la marca de 101.


4.      Se coloca en un roturador automático o se hace rotar manualmente de 2 a 3 minutos.   


5.      Agitar bien la pipeta y descartar de 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.


6.      Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10, luego con el objetivo de 40X contar sobre el cuadrado grande central de la cámara en solo 5 cuadrados pequeños; uno central y cuatro angulares (80 cuadritos en total).

7.      En el rencuentro se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera de las líneas limitantes superior izquierda en el cuadrado pequeño de rencuentro y no se consideran los correspondientes a los limites inferior y derecho. Se hace el rencuentro y no se consideran los correspondientes a los limites inferior y superior derecho. Se hace el rencuentro en la cuadricula central, las cuatro esquinas y el centro. 


Referencias:


Partículas por μl volumen =                           partículas contadas

                    superf. cont. (mm2) · Profundidad cámara (mm) · dilución

Valores de referencia:

(Unidades tradicionales millones de células/mm3)

Hombres: 4 500 000 - 5 500 000

Mujeres: 4 000 000 - 5 000 000

Niños (4 años): 4 200 000 - 5 200 000

Lactantes (1 -6 meses): 3 800 000 - 5 200 000

Recién nacidos: 5 000 000 - 6 000 000

Resultados:

PACIENTE: Ana Monserrat Zúñiga Aguilar

Conteo de las cuadriculas seleccionadas de rencuentro (cuadro central):

è Superior izquierdo:



VISTA 40X:

ERITROCITOS CONTADOS: 213

è Superior derecho:

Vista 40x:

Eritrocitos contados: 180
 

è Central:


Vista 40x:

Eritrocitos contados: 211
 

è Inferior izquierdo:


Vista 40x:

Eritrocitos contados: 236



è Inferior derecho:


Vista 40x:

Eritrocitos contados: 270



TOTAL DE ERITROCITOS CONTADOS: 1110



Formula de valoración:

Hematíes contados en 5 cuadrados pequeños se suman.



Nº de hematíes x mm3 = altura x dilución X área



Nº de hematíes x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000



Nº de hematíes x mm3 = hematíes contados x 10 000

Resultante:

No. De hematíes x mm3 = 1110 * 10 000 = 11100000

Observaciones:

Al efectuar este rencuentro observaos con claridad como estaba compuesta la cuadricula de Neubauer al igual se aprendió de manera clara y concreta como realizar este conteo.

Los números de glóbulos rojos más altos de lo normal pueden deberse a:


El conteo de glóbulos rojos se incrementará durante varias semanas cuando usted se traslade a una altitud mayor.

Los fármacos que pueden incrementar los conteos de glóbulos rojos abarcan:

  • Gentamicina
  • Metildopa

Los números de glóbulos rojos más bajos de lo normal pueden deberse a:

  • Anemia
  • Insuficiencia de la médula ósea (ejemplo, por radiación, toxinas o tumor)
  • Deficiencia de eritropoyetina (secundaria a enfermedad renal)
  • Hemólisis (destrucción de glóbulos rojos) debido a transfusión, lesión vascular u otra causa
  • Hemorragia (sangrado)
  • Leucemia
  • Desnutrición
  • Mieloma múltiple
  • Deficiencias nutricionales de:
  • Sobrehidratación
  • Embarazo

Los fármacos que pueden disminuir el conteo de glóbulos rojos son, entre otros:

  • Fármacos quimioterapéuticos
  • Cloramfenicol
  • Hidantoína
  • Quinidina

Conclusiones:

Al hacer este rencuentro no es muy concreto ya que pueden suceder diversos factores que puedan alterar los resultados de este pero en realidad no es muy seguro este rencuentro por eso es mejor realizar determinación del hematocrito.

Referencias:


·         http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003644.htm consultado el día: 10 de marzo de 2012.

·         http://www.thebody.com/content/art6194.html consultado el día: 11 de marzo de 2012.

·         Hematología fisioligia y diagnostico - Prof. TM. Dr. Iván Palomo González paginas consultadas: 85-88. Consultadas el dia 18 de marzo de 2012.

Manual de prácticas de fisiología animal veterinaria

·         Escrito por Salvador Ruiz López paginas consultadas: 32-34 consultadas el dia 19 de marzo de 2012.

miércoles, 7 de marzo de 2012

práctica 3: determinacion del hematocrito

PRACTICA: 3
DETERMINACION DE HEMATOCRITO
Objetivo:
Aprender a calcular o medir el hematocrito expresados como un porcentaje de volumen de sangre. En este expresando un resultado correcto ya que depende si existe alguna enfermedad de las células sanguíneas como lo son (anemia, policitemia, etc.)
Introducción:
Este método es uno de los más sencillos y exactos. El tubo de wintrobe (el mismo empleado para la VSE) Tiene 11.5 cm. De largo y 3mm de luz, esta graduado de 0 a 100 en mm con marcas también en cm. Tanto en sentido ascendente como descendente. La concentración final debe ser inferior a 2mg, de EDTA por ml de sangre de otra manera se encontraran anomalías en el hematocrito. Esto resulta especialmente importante cuando se utilizan uno al vacío que contiene gran cantidad de EDTA.
LECTURA: una vez que la centrifugación es completa el VGC se lee en escala de la derecha del tubo. La cifra obtenida (en cm)es multiplicada por 10 para dar el hematocrito como un porcentaje en resumen dando el valor del volumen de células centrifugadas por 100ml de sangre.
PRECISIÓN: en condiciones adecuadas el grado de error en el cálculo no debe exceder del 1 por 100. Este hace que el VCG constituya la mejor prueba aislada de anemia, policitemia, o hemoconcentración.
Este examen mide el volumen (cantidad) de glóbulos rojos en la sangre, comparado con otros componentes. Los resultados del examen se informan como un porcentaje o como un fragmento decimal de sangre entera
Fundamento:
Los exámenes de laboratorio pueden realizarse por muchas razones, como investigación rutinaria de salud o sospecha de enfermedad o de toxicidad. También pueden ser utilizados para determinar si la efectividad de un medicamento mejora o empeora. Los exámenes pueden medir el éxito o fracaso de un tratamiento. Pueden ser solicitados por razones médicas o legales. Las siguientes son posibles razones por las que este examen puede realizarse:
  • Anemia por deficiencia de hierro
  • Atrial myxoma
  • Chronic obstructive pulmonary disease
  • Divertículo de Meckel
  • Ehrlichiosis
  • Enfermedad renal en estadio terminal
  • Glomerulonefritis postestreptocócica aguda
  • Hemorragia gastrointestinal aguda
  • Incremento de los eritrocitos sanguíneos
  • Insuficiencia cardíaca
  • Sangrado excesivo agudo
  • Síndrome pulmonar por Hantavirus
Para hacer el hematocrito se puede hacer de dos formas: macro y micro que como lo mencionamos anteriormente se puede hacer con tubos wintrobe (macro) o con tubos capilares (micro).
Materiales:
  • tubo wintrobe graduado de 0- 100mm
  • pipetas Pasteur o pipetas de transferencia
  • centrifuga
  • micro centrífuga
  • tubo capilar con y sin anticoagulante
  • tubo vacutainer (tubo con EDTA)
  • material para venopunción.
  • Regleta
Técnica:
Macro método
  1. Se hace una venopuncion con tubo vacutainer este con EDTA (tubo lavanda).
  1. Este se mezcla bien con unos movimientos circulares 30 segundos aproximadamente.
  2. Con ayuda de la pipeta Pasteur se va llenando el tubo wintrobe desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo con precaución de que no quede ninguna bola de aire  
  1. Teniendo ya el tubo se coloca a la centrifuga, con 3000 rpm durante 30 minutos.
  1. Dar lectura al valor dado.
Micro método
  1. Se colocan dos tubos capilares uno con anticoagulante y un sin en la muestra sanguínea con EDTA. Estas colocándolas de una manera vertical para que suba la sangre con una cantidad de ¾.
  1. Se sella esta y se coloca en la micro centrifuga durante 5 minutos.
  1. Teniendo la muestra ya centrifugada se toma la lectura del volumen con ayuda de la regleta.
Resultados:
Valores normales de hematocrito……
Sexo y edad
Limites de VGC
Promedio de VCG
HOMBRES
40-54 por 100
47 por 100
MUJERES
37-47 por 100
42 por 100
RECIEN NACIDOS
44-64 por 100
54 por 100
1 AÑO
35 por 100
10 AÑOS
37.5 por 100
*volumen de glóbulos centrifugados.
Valores bajos de hematocrito
La disminución de glóbulos rojos en la sangre es una anemia. Se puede relacionar con diferentes condiciones, como hemorragia o leucemia.
Hay numerosos factores que pueden contribuir a desarrollar una anemia, como la baja en la ingesta de hierro, o pacientes con enfermedad renal crónica, que no generan suficiente eritropoyetina para estimular la producción de glóbulos rojos en la médula ósea. Aun así, solo se utilizan los valores de Hb para detectar si el paciente es o no anémico.
Valores altos de hematocrito
Se pueden asociar a deshidratación o hipoxia.
Patologías como la policitemia vera consisten en una desmedida producción de glóbulos rojos. En casos de enfermedad pulmonar obstructiva crónica, la hipoxia genera un aumento en la producción de eritropoyetina por el riñón, lo que puede resultar en un hematocrito alto.
Macro método:
En esta imagen podemos observar El valor que nos dio
Paciente: Rubí Joseline Castillo Juárez edad: 16 años
Eritrocitos: 42%
Micro método:
Paciente: Ana Monserrat Zúñiga Aguilar edad: 16 años
Eritrocitos: 41%
Observaciones:
La medición del hematocrito nos sirve para determinar alguna enfermedad por la disminución o el aumento de los hematíes ya que dependiendo de este podemos observar si hay enfermedad o no, como se habló anteriormente que enfermedades causa si sale alto o bajo el valor de este.
Conclusión:
Para dar lectura macro hematocrito: se lee en la escala derecha del tubo, considerando el extremo superior de la banda obscura de eritrocitos reducidos, inmediatamente la capa gris rojiza de leucocitos. La cifra obtenida (en cm). Es multiplicada por 10 para dar el hematocrito como un porcentaje, o sea el volumen de células centrifugadas por 100 ml de sangre.
Para la determinación del hematocrito es preferente utilizar sangre venosa con anticoagulante, ya que es importante para poder calcular los índices de wintrobe.
El hematocrito es una medición de la proporción del volumen que ocupan los eritrocitos en el volumen total de la sangre entera en una muestra de sangre.
Respecto al volumen total de la muestra de sangre venosa o capilar puede expresarse en porcentaje o como valor decimal.
Referencias: